技術データ
カラム/脱塩プレート Sephadex G-25 使用説明書
製品紹介
デキストランG-25脱塩カラム/プレートは、主にネットワーク構造を持つデキストランのゲルポリマー化合物の分子ふるい機能を利用しています。分離された物質の分子量のサイズが異なるため、分離された物質がG-25ゲルを通過する際、分子量の大きい物質（タンパク質など）はゲル粒子の外側にブロックされ、ゲル粒子の隙間から流出します。プロセスは短く、移動速度が速いため、分子量の大きい物質が最初にカラム/プレートから流出します。分子量の小さい物質（塩など）はゲル粒子の微細孔に浸透することができ、プロセスは長く遅く、分子量が大きい物質はゲルカラム/プレートから流出するのに時間がかかるため、最終的に洗い流され、このようにして物質が分離されます。
Sephadex G-25シリーズの培地のパラメータは表に示すとおりです。
| プロジェクト | パラメトリック |
| 特徴 | ダーティホワイトジェル |
| 平均粒子径（乾燥時） | 150±100μm 92.8 |
| 粒度分布（45-165μm）% | ≥80 |
| スプリットレンジ（ポルトガル語） | 100～5000 |
| 分離範囲（グロブリン） | 1000～5000 |
| 水比（ml湿潤接着剤/g乾燥粉末） | 2.3～2.7 |
| 線流量（0.3MPA、cm/h） | 697.1 |
| 最大流量(cm/h) | 150 |
| 保存液 | 0.2M NaAc 20%エタノール |
| 保管条件 | 4℃～30℃ |
モデル番号 G は、ゲル 1 グラムあたりの吸収される水の量を示します。たとえば、G-25 ゲル媒体は、乾燥ゲル 1 グラムあたり 2.5 ml の水が吸収されることを示します。これはゲルの膨張係数であり、ゲル粒子の細孔サイズでもあります。
Sephadex G-25 シリーズのクロマトグラフィー媒体は、バッファー交換、タンパク質の脱塩、異なる分子量のタンパク質の分離などに広く使用されています。脱塩およびバッファーの最大サンプル量は、カラムベッド容量の最大 30% です。
ワークフロー
1. スピーカー/タブレットのバランス調整：G-25 Sefadexを装着したスピーカー/タブレットを垂直に立て、カラム層の5～10倍量の緩衝液でG-25脱塩カラム/タブレットのバランス調整を行います。（注：緩衝液はPBS、脱イオン水など、置換する緩衝液です。流量を慎重に調整してください。）
2. サンプリング：ゲルカラム/プレートが緩衝液とバランスをとった後、サンプルをピペットで採取し、ゲル表面のふるいにゆっくりと加えます。底部のキャップを開け、サンプルがゲルと面一になるまでゆっくりとゲルに浸透させます。（注：底部のサンプル量は通常、カラム層体積の10～30%です。サンプル粘度が高くなりすぎると、G25グランドの耐用年数が短くなります。）
3. 溶出：サンプルはゲルに完全に浸透した後、溶出バッファーで溶出されます。（注：推奨されるサンプル流量は約1～2 ml/分です。溶出量は通常、サンプル量の1.2～2.0倍です）。
4. 精製と再生: 一部のタンパク質は生理食塩水中で変性するため、カラムベッドを 0.2 M NaOH または他の非イオン性洗剤で洗浄してこれらのタンパク質を精製する必要がある場合があります。
5. 保管：実験後は、0.02%アジ化ナトリウム溶液または20%エタノール溶液で保管してください。